In vitro regeneration of Hypericum patulum Thunb.--a medicinal plant.

A protocol was developed for high frequency plant regeneration in H. patulum by shoot-tip culture. H. patulum plants were collected from a wild source growing at high altitude in the eastern Himalayas. Multiple buds were initiated from shoot-tips cultured on Murashige and Skoog's medium supplemented with BAP, kinetin. Addition of thiamin HCI, Ca-pantothenate and biotin enhanced multiple shoot formation. Upon transfer to phytohormone free liquid medium following a brief exposure to auxin, root formation occurred from the micro shoots . Rooted plants were hardened and transferred to soil. Regeneration potentiality was found to be constant throughout the year in long term cultures.

Importancia del metabolismo de la biotina / Importance of biotin metabolism

La biotina pertenece al grupo de las vitaminas hidrosolubles del complejo B. En humanos la biotina está directamente involucrada en importantes procesos metabólicos como la gluconeogénesis, la síntesis de ácidos grasos y el catabolismo de algunos aminoácidos, debido a su papel como grupo prostético de las enzimas piruvato carboxilasa, propionil-CoA carboxilasa, b-metilcrotonil-CoA carboxilasa y de la acetil-CoA carboxilasa. La biotina se une al sitio activo de estas enzimas y funciona como acarreador de CO2. Las carboxilasas se sintetizan como apocarboxilasas, carentes de biotina y la forma activa se produce por la unión covalente de la biotina al grupo e-amino de un residuo de lisina de la apocarboxilasa, reacción catalizada por la holocarboxilasa sintetasa. El paso final de la degradación de las carboxilasas es el rompimiento de la fracción biotinil del grupo e-amino de la lisina que es catalizada por la biotinidasa y resulta en la liberación de la biotina libre, la cual puede ser nuevamente reciclada. La biotina regula, a nivel postranscripcional, la expresión de la propionil-CoA carboxilasa y, a nivel transcripcional, a la de la holocarboxilasa sintetasa. Además de su papel como cofactor y regulador de la biosíntesis de las carboxilasas, la biotina está involucrada en otras áreas del metabolismo, donde regula la síntesis de proteínas específicas entre las que se encuentran el receptor de la asialoglicoproteína, varias enzimas reguladoras del metabolismo de glucosa y proteínas que unen biotina en la yema de huevo, entre otras. La deficiencia de biotina se ha reportado en pacientes sometidos a una alimentación parenteral total, en personas que ingieren grandes cantidades de clara de huevo crudo, en niños con desnutrición energético proteínica severa y en personas con errores innatos del metabolismo. Entre estas últimas se encuentran las enfermedades autosómicas recesivas del metabolismo de biotina que resultan de la alteración de la actividad de la holocarboxilasa sintetasa o de la biotinidasa.

Efecto de la adición de Saccharomyces cerevisiae y melaza-urea sobre la digestibilidad in vivo e in situ en dietas para ovinos basadas en paja de cártamo / Effect of the addition of Saccharomyces cerevisiae and urea-molasses on in vivo and in situ digestibility in diets for sheep based on sesame straw

Se realizaron dos experimentos para evaluar los cambios en la digestibilidad de paja de cártamo (PAC) usando un suplemento melaza-urea (MU) y un probiótico (PRO; Saccharomyces cerevisiae). En el experimento 1, se determinó la degradabilidad in situ de fibra (FDN) con cánula ruminal en 12 ovinos (45 ñ 5.8 kg). Se incubaron in situ 4 g de muestra en base seca por periodos de 0, 6, 24, 48, 72 y 96 h, y se muestreó líquido ruminal a 0, 2, 4 y 6 h pospandrial para determinar pH y concentración de N amoniacal. Los resultados se analizaron usando un diseño completamente al azar con arreglo factorial de tratamiento (2 x 2 x 3), donde los factores fueron dos niveles de PRO (o vs .5 g/d intrarruminal), MU (0 vs 10 por ciento) y tres niveles de PAC (50, 60 y 70). La digestibilidad de FDN se incrementó (P< .05) por PRO (3.2 por ciento promedio) y MU (3 por ciento promedio) en todos los tiempos de incubación; también hubo diferencias (P< .05) en la digestión de FDN para 50 por ciento de PAC (35.9 por ciento) con respeco a 60 y 70 por ciento (31.82 y 30.75 por ciento, respectivamente). En el experimento 2 se midió la digestibilidad in vivo (DIV) usando 70 por ciento de PAC, dos niveles de pro (0 vs .05 g/animal/d) y MU (0 vs .10 por ciento) y una ración testigo (T5:40 por ciento PAC, 30 por ciento heno de alfalfa y 30 por ciento concentrado) en un diseño completamente al azar con arreglo factorial (2 x 2 + 1). Los tratamientos fueron: T1, MU 0 por ciento + PRO 0 por ciento; T2, MU 0 por ciento + PRO .5 por ciento; T3, MU 10 por ciento + PRO 0 por ciento y T4, MU 10 por ciento + PRO .5 por ciento. La DIVFDN (por ciento) fue diferente (P< .05) entre tratamientos: 66.8a (T4), 61.9ab (T5),52.2bc (T3),52.1bc (T2) y 41.5c (T1). No hubo cambios en comsumo y pH ruminal (P>.05). El número de protozoarios/ml x 10 3 fue diferente (P< .05) entre tratamientos: 1128a (T4), 950ab (T5), 900ab (T3), 764b (T2) y 771b (T1). Los resultados indican que el probiótico y el suplemento melaza-urea incrementaron la digestibilidad de la fibra y la población de protozoarios, los cuales pudieran haber influido en la digestibilidad de la fibra

Studies on the mechanism of biotin uptake by brusch-border membrane vesicles of hamster enterocytes

Several studies on biotin intestinal transport in the hamster have shown a biotin-specific carrier, but there are conflicting reports on whether it is transported actively, or by facilitated diffusion and on its Na+ dependence. We have studied it for the first time using brush-border membrane vesicles (BBMV), with concentrations in a more physiological (nanomolar)range and found an overshoot component, evidencing a carrier-mediated active process, driving the vitamin against a concentration gradient. Uptake was substantially reduced when potassium substituted for sodium. When the vesicles were treated with trypsin, Na+-dependent uptake was markedly reduced and the overshoot phenomenon was abolished, providing additional evidence for the carrier-mediated trasnport. The amount of uptake in a K+ gradient was considered due to passive diffusion and was about 30 percent of that observed in a Na+ gradient. A similar amount was observed when trypsinized vesicle were incubated in this latter gradient. Our results indicate that in the hamster's brush border intestinal epithelium, Na+-dependent active transport is the most important component in the intestinal uptake of biotin at nanomolar concentrations